Me pehea te whakamahi tika i te ngongo cryopreservation
Ko te whakamahinga o te ngongo tangihanga he mea putaiao, ehara i te mea he torutanga ngawari penei i te whakatuwhera i te tank hauota wai, te tuku ki roto i te ngongo cryopreservation me te kati i te tank hauota wai.Ka taea e te whakamahi puiao me te tika o nga ngongo cryopreservation te karo i te ngaro o nga tauira me te tiaki i te haumarutanga o nga kaiwhakamatautau.
Ko te whakamahinga o te ngongo tangihanga he mea putaiao, ehara i te mea he torutanga ngawari penei i te whakatuwhera i te puna hauota wai, te tuku ki roto i te ngongo cryopreservation me te kati i te tank hauota wai.Ka taea e te whakamahi puiao me te tika o nga ngongo cryopreservation te karo i te ngaro o nga tauira me te tiaki i te haumarutanga o nga kaiwhakamatautau.
Ngongo whakatio: nga hikoi whakatio
Horoia nga pūtau ki te wairewa PBS kua whakamahana i mua, ka ngotea te wairewa, ka hipoki i nga ruma ki te otinga kei roto trypsin me EDTA (he nui te paparanga wai angiangi, a me whakatau te kukū o te trypsin me te EDTA i runga i te raina pūtau).
Whakanuia nga pūtau i te 37 ℃ mo te 3-5 meneti.
Whai muri i te wehenga o nga pūtau mai i te raro, ka mutu te heki, ka taapirihia te reo e mau ana te serum, ka ata whakatarihia nga ruma ki te pipette.
Whakanuia te whakatārewatanga pūtau (500 xg, 5 min) me te whakatārewatanga ki te reo kei roto serum.
Tatau pūtau.
Purihia te whakatārewatanga pūtau (500 xg, 5 meneti), tango i te supernatant, ka whakatārewatia nga pūtau me te reo e mau ana te serum e tika ana.
Whakaranuhia nga pūtau me te otinga cryopreservation (60% reo, 20% fetal bovine serum, 20% DMSO) i roto i te 1:1 ōwehenga rōrahi, ka whakawhiti ki te ngongo cryopreservation Cryo STM.Ko te kiato o nga pūtau tio he 1-5 × 106 mongamonga/ml.
Ko te Cryo kei roto nga pūtau STM cryopreservation ngongo e tūtohu ana kia whakamatao i te tere o − 1 K/mene, ka taea te tuku i te ngongo cryopreservation ki roto i te ipu kei roto te isopropanol i te − 70 ℃.Mena kei te rongoa a Cryo STM cryopreservation ngongo etahi atu tauira, ka taea te whakanoho tika ki te − 20 ℃, − 70 ℃ te wahanga hau o te hauota wai.Kia noho rite te tauira, 4 mL me te 5 mL Cryo Me whakanoho te ngongo cryopreservation sTM ki roto i te pouaka whakamātao i te − 20 ℃ mo te po, katahi ka whakawhiti ki te wahanga hau o − 70 ℃, hauota wai ranei.
Katahi ka whakawhitia te ngongo cryopreservation Cryo.sTM ki te tank hauota wai.Hei karo i te parahanga (penei i te mycoplasma) me nga whakaaro mo te haumaru, waihohia te ngongo cryopreservation Cryo.sTM ki te wahanga hau o te hauota wai, kaua ki te wahanga wai.
Me pehea te whakamahi tika i te ngongo cryopreservation?Ko ta maatau kamupene he tohunga ngaio me nga ahuatanga ahumahi me nga wheako maakete nui ki te whakarato hua mo te mara rangahau pūtaiao ora me nga ratonga mo nga kairangahau pūtaiao.Kaore e taea e ia te whakatutuki i nga whakaritenga motuhake a nga kaihoko R&D mo nga momo hua me te kapi, engari ka tutuki ano hoki nga hiahia matawhānui o nga umanga whakangao i nga waahanga katoa mai i te iti, te tauine reo ki te hanga nui.
Te wa tuku: Noema-25-2022