He maha nga enzyme e whakamahia ana i roto i nga whakamatautau PCR

Tauhohenga mekameka polymerase, whakapotohia heiPCRi te reo Ingarihi, he tikanga koiora irapoi hei whakanui ake i nga maramara DNA.Ka taea te kii he tukurua DNA motuhake i waho o te tinana, ka nui ake te iti o te DNA.I te wa katoaPCRte tukanga tauhohenga, ko tetahi o nga momo matū e whai waahi nui ana – ko te enzymes.

1. Taq DNA

I nga whakamatautau i nga ra tuatahi oPCR, I whakamahia e nga kaiputaiao te Escherichia coli DNA polymerase I, Engari he raruraru kei roto i tenei whaakiki: me whakakii ano i nga wa katoa ka mahia he huringa, na te mea he uaua nga waahanga mahi, he uaua ki te whakakaha aunoa.I whakatauhia tenei raru i muri i te wehe a nga kaiputaiao i te Taq DNA polymerase mai i te Thermus aquaticus i te tau 1988. Mai i tera wa, kua tino pono te whakakaha aunoa o te DNA.Ko te kitenga o tenei enzyme ka hanga anoPCRhangarau he hangarau watea, whai kiko me te ao.I tenei wa, ko Taq DNA polymerase te polymerase tino noa i roto i nga kete DNA.

2. PfuDNA

Ka rite ki te korero i runga ake nei, he pepeke nui a Taq DNase, no reira kua whakarerekehia e nga kaiputaiao te Taq DNA polymerase ki tetahi waahanga kia kore ai e whakakaha te kore-motuhake na te kore o te tauritenga, ka puta he hua whakamatautau.Engari ko te whakarereketanga o te Taq DNA polymerase ka taea te aukati i te mahi o te DNA polymerase i te pāmahana rūma.Ka taea e te PfuDNA polymerase te whakatika i nga ngoikoretanga o runga ake o te Taq DNA polymerase, kia pai ai te mahi o te tauhohenga PCR, ka taea te whakapai ake i te reeti angitu o te whakanui ira ira.

3. Whakamuri Transcriptase

I kitea te transcriptase whakamuri i te tau 1970. Ka whakamahia e tenei enzyme te RNA hei tauira, te dNTP hei tïpako, e whai ana i te kaupapa o te takirua turanga, me te whakahiato i te whenu kotahi DNA e hono ana ki te tauira RNA i te ahunga 5′-3′.Ko te transcriptase whakamuri kei te tino whakawhirinaki ki te mahi DNA polymerase mai i nga tauira DNA, RNA ranei, na reira kaore he mahi exonuclease 3'-5'.Heoi, he mahi RNase H, e whakawhāiti ana i te roa o te whakahiatotanga o te whakamuri transcriptase ki tetahi waahanga.Na te iti o te pono me te whakamaarama o te mohoao whakamuri transcriptase, i whakarereketia e nga kaiputaiao.

MoPCRnga whakamatautau, ko nga mea nui e pau ana: ngongo PCR takitahi, ngongo PCR 4/8-strip, pereti PCR.

Ko LabioNga paunga PCRwhai i nga mea e whai ake neipainga:

Pereti PCR: Te hototahitanga o te paihikara waiariki;He tino rerekee, he ngawari te tautuhi pai;pai te whakaata whakaata;paiwhakawhiti wera;DNase whaimana, RNase, DNA, aukati PCR, me te kore-pyrogen kua whakamatauria.

Nga ngongo PCR takitahi: Whakaetonga-ātete; paiwhakawhiti wera;te tino marama o te mata; DNase whaimana, RNase, DNA, aukati PCR, me te kore-pyrogen kua whakamatauria.

4/8-pupuhi ngongo PCR: Ko nga pakitara tino angiangi; te marama nui;Ka taea te whakamahi i roto i te ahumahi rongoa, te ahumahi kai, me te koiora irapoi; te kounga teitei, te wahine PP rauemi; DNase whaimana, RNase, DNA, aukati PCR, me te kore-pyrogen kua whakamatauria.